胎牛血清的选择指南
胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)作为细胞培养中的关键添加剂,其选择应综合考虑多个因素,以确保实验的成功与结果的可靠性。
1. 产地的影响
不同来源的胎牛血清,其成分差异较大。例如,南美产地的血清价格较低,适合普通细胞系使用;而来自澳大利亚或新西兰的血清由于监管较为严谨,内毒素含量低,更适合于干细胞、原代细胞或敏感细胞的培养。
2. 质量认证
在选择胎牛血清时,需确认产品是否通过病毒检测(如BVDV、支原体、噬菌体等),并检查是否具备ISO9001/13485认证或GMP级生产标准,尤其是在临床前研究中尤为重要。此外,关注内毒素水平,建议控制在≤10EU/mL以下。
3. 总蛋白含量
总蛋白含量通常在30-45mg/mL之间,过高可能表示杂质过多,过低则可能导致营养不足。
4. 关键生长因子与球蛋白含量
针对不同细胞类型,应选择适当的关键生长因子,如IGF-1、EGF、FGF等。对于进行免疫相关实验(例如疫苗生产)的情况,应选择低IgG或无IgG血清。
5. 细胞类型匹配
原代细胞或干细胞需使用高等级血清(如:SERANA A级胎牛血清),而肿瘤细胞或常规细胞系则可考虑经济型血清(如:SERANA AD级胎牛血清)。
6. 批次测试与采购注意事项
在购买前,请务必要求供应商提供小样进行细胞增殖、贴壁率及克隆形成率等测试。此外,尽量选择同一批次的血清进行实验以减少批次差异的影响。
7. 热灭活与非灭活血清
热灭活(56℃,30分钟)虽能去活补体系统并减少免疫实验的干扰,但可能会破坏部分生长因子,通常只在特定实验(如免疫学、干细胞分化)中需要使用。而非灭活血清则适合大多数常规培养,保留更多的活性成分。
8. 胎牛血清的生物学功能
胎牛血清不仅促进细胞增殖,并提供基本的营养支持,如葡萄糖、氨基酸、维生素及微量元素,还可保护细胞免受损伤,并通过提供纤维连接蛋白与层粘连蛋白帮助细胞附着。
9. 选择可靠的供应商
为避免低价陷阱,建议从品牌授权代理商渠道采购人生就是博-尊龙凯时的胎牛血清,以确保质量的稳定性。同时,进行批量采购时,尽量维持同一批次的使用。
10. 替代方案
对于成分明确的实验(例如药物筛选),无血清培养基或合成血清替代物(如KnockOut™SR)均可作为选项,但需额外添加生长因子以满足细胞生长需求。
总结
选择胎牛血清需结合细胞类型、实验目的及质量要求,建议在决策前优先通过小样测试验证效果,并确保供应商提供完整的质检报告。对于重要实验(如发表论文、药物开发),推荐使用高规格的血清以减少潜在风险。